本公司所有產(chǎn)品僅供實(shí)驗(yàn)室科學(xué)研究使用,不得用于醫(yī)療診斷,食品,化妝品和其他用途。
產(chǎn)品信息價(jià)格說(shuō)明書(shū)等相關(guān)資料,可以聯(lián)系客服咨詢索取。
HEPENGBIO冰凍切片細(xì)胞色素氧化酶活性染色試劑盒產(chǎn)品說(shuō)明書(shū)
主要用途
HEPENGBIO冰凍切片細(xì)胞色素氧化酶活性染色試劑是一種旨在使用細(xì)胞色素C催化人工電子供體染料二氨基聯(lián)苯胺的非酶源性自然氧化,形成棕褐色不溶性產(chǎn)物,來(lái)分析冰凍組織樣品中細(xì)胞色素氧化酶活性的方法。主要適用于動(dòng)物組織細(xì)胞的細(xì)胞色素氧化酶活性的定性檢測(cè)。產(chǎn)品嚴(yán)格無(wú)菌,即到即用,操作簡(jiǎn)捷,性能穩(wěn)定,顯色清晰。
技術(shù)背景
細(xì)胞色素氧化酶(Cytochrome oxidase)是氧化呼吸鏈的酶部分的總稱。其存在于真核生物的細(xì)胞線粒體上,主要通過(guò)氧化磷酸化為細(xì)胞提供能量。二氨基聯(lián)苯胺(3,3’-diaminobenzidine,DAB)是人工電子供體染料,通過(guò)與金屬蛋白,例如含鐵蛋白細(xì)胞色素C中的物理性結(jié)合,產(chǎn)生非酶源性自然氧化,同時(shí)提供電子(細(xì)胞色素C作為電子受體)于呼吸鏈的電子傳遞系統(tǒng),由此呈現(xiàn)出顏色變化和沉積,形成棕褐色不溶性產(chǎn)物,且不受乙醇影響。在DAB自然氧化的同時(shí),產(chǎn)生活性氧,例如過(guò)氧化氫,由過(guò)氧化氫酶防止其聚集。在大量氧化型DAB的存在下,通過(guò)細(xì)胞色素氧化酶的作用,亞鐵細(xì)胞色素C被氧化成正鐵細(xì)胞色素C。由此氧化型DAB棕褐色不溶性產(chǎn)物被用于檢測(cè)組織細(xì)胞中細(xì)胞色素氧化酶的活性。
產(chǎn)品內(nèi)容
HEPENGBIO清理液(Reagent A) 100毫升
HEPENGBIO染色液(Reagent B) 10毫升
HEPENGBIO反應(yīng)液(Reagent C) 4瓶
HEPENGBIO固著液(Reagent D) 10毫升
產(chǎn)品說(shuō)明書(shū) 1份
保存方式
保存HEPENGBIO染色液(Reagent B)和HEPENGBIO反應(yīng)液(Reagent C)在-20℃冰箱里,避免光照;其余的保存在4℃冰箱里,有效保證6月
用戶自備
培養(yǎng)箱:用于反應(yīng)孵育
中性樹(shù)脂:用于切片封片
光學(xué)顯微鏡:用于切片染色后觀察分析
實(shí)驗(yàn)步驟
染色開(kāi)始前,將-20℃冰箱里的試劑置于室溫下融化;移取2.5毫升HEPENGBIO染色液(Reagent B)到1瓶HEPENGBIO反應(yīng)液(Reagent C)里,混勻,標(biāo)記為HEPENGBIO反應(yīng)工作液,置于冰槽里,避免光照。
1. 取出待測(cè)的10至15微米厚的冰凍組織切片
2. 小心加上200微升HEPENGBIO清理液(Reagent A)在切片上,鋪滿整個(gè)樣品表面
3. 小心移去切片上的HEPENGBIO清理液(Reagent A)
4. 小心加上200微升 HEPENGBIO反應(yīng)工作液,鋪滿整個(gè)切片樣品表面
5. 放進(jìn)37℃培養(yǎng)箱里孵育60分鐘,避免光照
6. 小心移去切片上的HEPENGBIO反應(yīng)工作液
7. 小心加上200微升HEPENGBIO清理液(Reagent A)在切片上,鋪滿整個(gè)切片樣品表面
8. 小心移去切片上的HEPENGBIO清理液(Reagent A)
9. 重復(fù)實(shí)驗(yàn)步驟6至8二次
10. 小心加上200微升HEPENGBIO固著液(Reagent D)在切片上,鋪滿整個(gè)切片樣品表面
11. 室溫下孵育15分鐘
12. 小心移去切片上的HEPENGBIO固著液(Reagent D)
13. 小心加上200微升HEPENGBIO清理液(Reagent A)在切片上,鋪滿整個(gè)切片樣品表面
14. 小心移去切片上的HEPENGBIO清理液(Reagent A)
15. 重復(fù)實(shí)驗(yàn)步驟13至14二次
16. (選擇步驟)復(fù)染(建議使用HEPENGBIO蘇木素復(fù)染試劑盒)
17. 放上蓋玻片或封片(中性樹(shù)脂)
18. 即刻在光學(xué)顯微鏡下觀察和計(jì)數(shù):表達(dá)細(xì)胞色素氧化酶活性的組織細(xì)胞為陽(yáng)性組織細(xì)胞,呈現(xiàn)棕色。
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HEPENGBIO冰凍切片細(xì)胞色素氧化酶活性染色試劑盒產(chǎn)品說(shuō)明書(shū)
主要用途
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技術(shù)背景
細(xì)胞色素氧化酶(Cytochrome oxidase)是氧化呼吸鏈的酶部分的總稱。其存在于真核生物的細(xì)胞線粒體上,主要通過(guò)氧化磷酸化為細(xì)胞提供能量。二氨基聯(lián)苯胺(3,3’-diaminobenzidine,DAB)是人工電子供體染料,通過(guò)與金屬蛋白,例如含鐵蛋白細(xì)胞色素C中的物理性結(jié)合,產(chǎn)生非酶源性自然氧化,同時(shí)提供電子(細(xì)胞色素C作為電子受體)于呼吸鏈的電子傳遞系統(tǒng),由此呈現(xiàn)出顏色變化和沉積,形成棕褐色不溶性產(chǎn)物,且不受乙醇影響。在DAB自然氧化的同時(shí),產(chǎn)生活性氧,例如過(guò)氧化氫,由過(guò)氧化氫酶防止其聚集。在大量氧化型DAB的存在下,通過(guò)細(xì)胞色素氧化酶的作用,亞鐵細(xì)胞色素C被氧化成正鐵細(xì)胞色素C。由此氧化型DAB棕褐色不溶性產(chǎn)物被用于檢測(cè)組織細(xì)胞中細(xì)胞色素氧化酶的活性。
產(chǎn)品內(nèi)容
HEPENGBIO清理液(Reagent A) 100毫升
HEPENGBIO染色液(Reagent B) 10毫升
HEPENGBIO反應(yīng)液(Reagent C) 4瓶
HEPENGBIO固著液(Reagent D) 10毫升
產(chǎn)品說(shuō)明書(shū) 1份
保存方式
保存HEPENGBIO染色液(Reagent B)和HEPENGBIO反應(yīng)液(Reagent C)在-20℃冰箱里,避免光照;其余的保存在4℃冰箱里,有效保證6月
用戶自備
培養(yǎng)箱:用于反應(yīng)孵育
中性樹(shù)脂:用于切片封片
光學(xué)顯微鏡:用于切片染色后觀察分析
實(shí)驗(yàn)步驟
染色開(kāi)始前,將-20℃冰箱里的試劑置于室溫下融化;移取2.5毫升HEPENGBIO染色液(Reagent B)到1瓶HEPENGBIO反應(yīng)液(Reagent C)里,混勻,標(biāo)記為HEPENGBIO反應(yīng)工作液,置于冰槽里,避免光照。
1. 取出待測(cè)的10至15微米厚的冰凍組織切片
2. 小心加上200微升HEPENGBIO清理液(Reagent A)在切片上,鋪滿整個(gè)樣品表面
3. 小心移去切片上的HEPENGBIO清理液(Reagent A)
4. 小心加上200微升 HEPENGBIO反應(yīng)工作液,鋪滿整個(gè)切片樣品表面
5. 放進(jìn)37℃培養(yǎng)箱里孵育60分鐘,避免光照
6. 小心移去切片上的HEPENGBIO反應(yīng)工作液
7. 小心加上200微升HEPENGBIO清理液(Reagent A)在切片上,鋪滿整個(gè)切片樣品表面
8. 小心移去切片上的HEPENGBIO清理液(Reagent A)
9. 重復(fù)實(shí)驗(yàn)步驟6至8二次
10. 小心加上200微升HEPENGBIO固著液(Reagent D)在切片上,鋪滿整個(gè)切片樣品表面
11. 室溫下孵育15分鐘
12. 小心移去切片上的HEPENGBIO固著液(Reagent D)
13. 小心加上200微升HEPENGBIO清理液(Reagent A)在切片上,鋪滿整個(gè)切片樣品表面
14. 小心移去切片上的HEPENGBIO清理液(Reagent A)
15. 重復(fù)實(shí)驗(yàn)步驟13至14二次
16. (選擇步驟)復(fù)染(建議使用HEPENGBIO蘇木素復(fù)染試劑盒)
17. 放上蓋玻片或封片(中性樹(shù)脂)
18. 即刻在光學(xué)顯微鏡下觀察和計(jì)數(shù):表達(dá)細(xì)胞色素氧化酶活性的組織細(xì)胞為陽(yáng)性組織細(xì)胞,呈現(xiàn)棕色。
檢測(cè)報(bào)告(COA)
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