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| HPBIO-JM2563 | 酚氯仿法DNA萃取試劑盒 | 50次 |
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HEPENGBIO酚氯仿法（PC8）DNA萃取試劑盒產(chǎn)品說明書
主要用途
HEPENGBIO酚氯仿法（PC8）DNA萃取試劑是一種旨在使蛋白質(zhì)變性（denaturation），同時徹底清除蛋白質(zhì)（deproteination）及其它成分來達到純化DNA的方法。其適用于單純DNA和RNA操作或PCR產(chǎn)物的萃取以及SAGE技術等。產(chǎn)品即到即用，性能穩(wěn)定，嚴格無核酶污染，萃取純度高。
技術背景
酚或酚氯仿混合物是提純核酸成分的重要步驟。通過這些化學處理，使混雜在核酸里的蛋白質(zhì)二維結構受到破壞，然后經(jīng)過相位分離將非核酸成分除去，為下一步乙醇濃縮沉淀打好基礎。HEPENGBIO酚氯仿試劑較之傳統(tǒng)的配方更優(yōu)化。
產(chǎn)品內(nèi)容
HEPENGBIO緩沖液（Reagent A） 20毫升
HEPENGBIO萃取液（Reagent B） 30毫升
HEPENGBIO濃縮液（Reagent C） 5毫升
HEPENGBIO沉淀液（Reagent D） 50毫升
HEPENGBIO助沉液（Reagent E） 50微升
HEPENGBIO清理液（Reagent F） 50毫升
產(chǎn)品說明書 1份
保存方式
保存在－20℃冰箱里，避免光照，有效保證6月
用戶自備
1.5毫升離心管：用于樣品操作的容器
渦旋震蕩儀：用于樣品混勻
微型臺式離心機：用于樣品分離
實驗步驟
1． 準備1個新的1.5毫升離心管
2． 加入300微升樣品或加入適量的HEPENGBIO緩沖液（Reagent A）達到樣品總容量為300微升
3． 加入300微升HEPENGBIO萃取液（Reagent B）到1.5毫升離心管
4． 按上蓋子后，在渦旋震蕩儀上強烈震蕩30秒
5． 放進微型臺式離心機離心5分鐘，速度為16000g（或13000RPM，例如eppendorf 5415）
6． 移出上層液相溶液到新的1.5毫升離心管，留下25微升相位交界面的溶液
7． （選擇步驟）如果樣品本身污染嚴重（例如含有過多組織蛋白等），重復實驗步驟3至6
8． 加入100微升HEPENGBIO濃縮液（Reagent C）到離心管
9． 加入1毫升HEPENGBIO沉淀液（Reagent D）
10． 加入1微升HEPENGBIO助沉液（Reagent E）
11． 在渦旋震蕩儀上震蕩15秒，充分混勻
12． （選擇步驟）如果DNA樣品為納克級或片斷為20個堿基，選擇置于－70℃冰箱孵育2小時或－20℃冰箱孵育過夜
13． 放進微型臺式離心機離心15分鐘，速度為16000g（或13000RPM，例如eppendorf 5415）
14． 小心抽去上清液
15． 加入1毫升HEPENGBIO清理液（Reagent F）
16． 放進微型臺式離心機離心15分鐘，速度為16000g（或13000RPM，例如eppendorf 5415）
17． 小心抽去上清液
18． 空氣中晾干
19． 加入100微升HEPENGBIO緩沖液（Reagent A）
20． 放進－20℃冰箱長期保存
21． 進行后續(xù)乙醇沉淀
注意事項
1． 本產(chǎn)品為50次操作
2． 操作時須戴手套
3． HEPENGBIO萃取液（Reagent B）具有腐蝕性，使用時小心謹慎
4． 如果樣品量增加，則相應增加試劑用量：樣品容量和試劑用量等量使用；最低不得低于200微升
5． HEPENGBIO萃取液（Reagent B）和樣品要充分混勻
6． 移出操作時，避免接觸相位界面，以防污染
本公司提供系列核酸純化試劑產(chǎn)品
