測(cè)定意義
植物葉綠素、類胡蘿卜素廣泛存在于綠色植物組織中,其含量與光合作用、營(yíng)養(yǎng)狀況密切相關(guān),是反應(yīng)植物生長(zhǎng)狀況的重要指標(biāo)。
測(cè)定原理
根據(jù)葉綠體色素提取液對(duì)可見光譜的吸收,在某一特定波長(zhǎng)測(cè)定其吸光度,即可用公式計(jì)算出提取液中各色素的含量。根據(jù)朗伯—比爾定律,某有色溶液的吸光度A與其中溶質(zhì)濃度C和液層厚度L成正比,即A=αCL式中:α比例常數(shù)。各種有色物質(zhì)溶液在不同波長(zhǎng)下的吸光系數(shù)可通過測(cè)定已知濃度的純物質(zhì)在不同波長(zhǎng)下的吸光度而求得。如果溶液中有數(shù)種吸光物質(zhì),則此混合液在某一波長(zhǎng)下的總吸光度等于各組分在相應(yīng)波長(zhǎng)下吸光度的總和。這就是吸光度的加和性。測(cè)定葉綠體色素混合提取液中葉綠素a、b和類胡蘿卜素的含量,只需測(cè)定該提取液在三個(gè)特定波長(zhǎng)下的吸光度A,并根據(jù)葉綠素a、b及類胡蘿卜素在該波長(zhǎng)下的吸光系數(shù)即可求出其濃度。在測(cè)定葉綠素a、b時(shí)為了排除類胡蘿卜素的干擾,所用單色光的波長(zhǎng)選擇葉綠素在紅光區(qū)的最大吸收峰。