測(cè)定意義:
糖原磷酸化酶(Glycogen phosphorylase,GP,EC 2.4.1.1))是糖原分解代謝的關(guān)鍵酶,使糖 原分子從非還原端逐個(gè)斷開(kāi) α-1,4-糖苷鍵移去葡萄糖基,釋放 1-磷酸葡萄糖,直至臨近糖 原分子 α-1,6-糖苷鍵分支點(diǎn)前 4 個(gè)葡萄糖基處。GP 分為有活性的糖原磷酸化酶 a(GPa) 和無(wú)活性的糖原磷酸化酶 b(GPb)兩種形式。GPb 在一定濃度的腺苷酸(5,-AMP)存在 下可被激活。
測(cè)定原理:
GP 催化糖原和無(wú)機(jī)磷產(chǎn)生葡萄糖殘基生成糖原和 1-磷酸葡萄糖,磷酸葡萄糖變位酶和 6-磷 酸葡萄糖脫氫酶進(jìn)一步依次催化 NADP 還原生成 NADPH,在 340nm 下測(cè)定 NADPH 上升 速率,即可反映 GP 活性。添加一定濃度的腺苷酸(5,-AMP)時(shí)測(cè)定 GP(GPa 和 GPb)活 性,未添加腺苷酸(5,-AMP)時(shí)測(cè)定 GPa 活性,GP 活性-GPa 活性得到 GPb 活性。
檢測(cè)報(bào)告(COA)
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